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技術(shù)帖 | 甲基化捕獲測序和 850K 芯片參數(shù)大 PK
發(fā)布時間:2020-06-18 瀏覽次數(shù):8239
SureSelectXT甲基化靶向序列捕獲平臺(Methyl-Seq)是安捷倫公司推出的全面的甲基化發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)。該平臺為甲基化基因組區(qū)域研究提供了具有單堿基分辨率,同時高效可靠的檢測方法。

簡介

SureSelectXT 甲基化靶向序列捕獲平臺(Methyl-Seq) 是安捷倫公司推出的全面的甲基化發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)。該平臺為甲基化基因組區(qū)域研究提供了具有單堿基分辨率,同時高效可靠的檢測方法。現(xiàn)有目錄化產(chǎn)品包括人、小鼠和大鼠甲基化測序設(shè)計。該產(chǎn)品相比常見的甲基化檢測平臺具有獨到的優(yōu)勢:

●通過檢測單獨的 CpG 可獨具特色地提供比甲基化芯片更多的信息

相比全基因組重亞硫酸鹽測序,可提高通量并降低成本

可發(fā)現(xiàn)限制性內(nèi)切酶及免疫沉淀所不能檢測的甲基化區(qū)域


優(yōu)勢

●84 Mb 設(shè)計覆蓋 370 萬 CpG 位點

不依賴于甲基化狀態(tài)的探針

高靈敏度,分辨率可達(dá)到單個堿基

提高通量并降低成本

與現(xiàn)有甲基化方法相比,可降低偏差 (bias)


捕獲測序數(shù)據(jù)與甲基化芯片的比較分析

1

表 1 捕獲測序探針設(shè)計區(qū)域與 850K 芯片理論探針交集

2

表 2 甲基化捕獲測序與 850K 芯片的全方面比較


3

圖 1 測序數(shù)據(jù)量與捕獲區(qū)域檢測 CpG 位點飽和曲線


4

圖 2 測序 10×覆蓋,15G 數(shù)據(jù)量下與 850K 重疊位點統(tǒng)計


5

圖 3 測序 10×覆蓋,15G 數(shù)據(jù)量下與 850K 重疊位點的相關(guān)性分析

通過對比,發(fā)現(xiàn)甲基化捕獲測序?qū)τ谔囟ɑ虻母采w位點數(shù)上明顯優(yōu)于甲基化芯片。6

圖 4 MTOR、EGRF、TP53 基因在兩種甲基化研究技術(shù)下的甲基化水平分析。

紅色為 850K 數(shù)據(jù),藍(lán)色為捕獲測序數(shù)據(jù)。

報告大升級 640

新增結(jié)果展示

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7

圖 5 顯著差異的高低甲基化位點在不同功能區(qū)域的富集圖


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圖 6 沖擊圖


9

圖 7 火山圖

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